Las reacciones de obtención de energía de la glucosa se basan en un mismo sustrato, es decir, cuando la molécula de 6C se parte en 2 de 3C, las reacciones subsecuentes son las mismas, por esta razón en algunos esquemas de la glucolisis se ve un punto de bifurcación.
Sin embargo las dos moléculas obtenidas en el paso 4 no son las mismas, por lo que se requiere un paso intermedio de isomerización, es decir de convertir ambas moléculas en la misma especie química.
Las dos moléculas son dihidroxiacetona y gliceraldehído-3-fosfato, de ambas solo la última puede seguir las demás reacciones de la glucolisis, mientras que la primera debe isomerizarse a gliceraldehído-3-fosfato para seguir la ruta metabólica.
La reacción es catalizada por la enzima triosa fosfato isomerasa PRINCIPAL REGRESAR